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實用干貨 | 酵母細胞如何有效計數?

發布時間(jian):2023-07-24瀏覽:388次

酵(jiao)(jiao)母(mu)(mu)(mu)細胞,也(ye)稱(cheng)酵(jiao)(jiao)母(mu)(mu)(mu)菌,在完成(cheng)酵(jiao)(jiao)母(mu)(mu)(mu)細胞的制備后,科研人員需對(dui)酵(jiao)(jiao)母(mu)(mu)(mu)細胞的數量、死(si)活、大(da)小(xiao)等進行測定(ding),觀測酵(jiao)(jiao)母(mu)(mu)(mu)細胞的生長狀態。

目(mu)(mu)前酵(jiao)母(mu)(mu)細胞可應(ying)用(yong)于(yu)(yu)食品工業(ye)、醫藥(yao)研究等領域,其(qi)中(zhong)畢赤(chi)酵(jiao)母(mu)(mu)細胞表(biao)達(da)體系(xi)(xi)是目(mu)(mu)前已知酵(jiao)母(mu)(mu)體系(xi)(xi)中(zhong)表(biao)現ZuiHao的蛋白表(biao)達(da)體系(xi)(xi)之一(yi),可被(bei)用(yong)于(yu)(yu)納米抗體等醫藥(yao)疫苗方面。

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亞甲基藍染色法+人工顯微鏡計數(傳統方法)

傳統對酵母細胞的計數是以《國標:GB/T20886-2007,食品加工用酵母》為計數規則,使用亞甲基藍染色的方法,通過高倍數的顯微鏡和血細胞計數板-對酵母細胞進行人工觀測計數。

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但亞甲基藍(lan)染料存在部分酵母細胞(bao)無(wu)法(fa)正常染色(se)(se)、染色(se)(se)時間長,且人(ren)工計數(shu)存在操作過(guo)程(cheng)繁(fan)瑣、計數(shu)不準確、數(shu)據(ju)無(wu)法(fa)追溯等缺陷。



熒光酵母細胞計數儀+AOPI熒光染料 (新方法)

熒光酵母細胞計數儀,利用AOPI雙色熒光染色的方法,更加準確地得出酵母細胞的數量和活率,相比于人工顯微鏡計數操作更便捷、計數時間更短、數據可追溯等。

前期準備示意圖.jpg

前期(qi)準備熒光酵母細胞計數儀-細胞計數片-酵母細胞樣品-AOPI熒光染料-移液器


操作(zuo)流(liu)程

1-用移液器,按11比例取酵母細胞樣品和AOPI熒光染料

2-用移液器反復吹打幾次,混勻后,取10uL細胞樣品,加樣至細胞計數片

3-上樣后,選擇相(xiang)對應(ying)的細胞樣品類(lei)型(xing)

4-點擊“開始計數"——“查看數據"即可(全程(cheng)自動化操作,可(ke)實時觀(guan)察細胞圖像)


儀(yi)器介紹

JSY-FL-052型熒光酵母細胞計數儀,高倍放大光學系統,雙色熒光通道,對直徑≥1um的酵母細胞進行精準計數分析。

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儀器實拍細胞圖

1-釀酒酵(jiao)母細胞(識(shi)別圖)





2-畢赤酵母細胞(識別圖)



詳情(qing)數據

計數結果包括總細胞濃度、活/死細胞濃度、活/死細胞比率、總細胞聚團率/濃度、活細胞聚團率/濃度、死細胞聚團率/濃度、活/死細胞直徑等計數結果、原始圖片、識別圖片、報告單等


 

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