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細胞計數用臺盼藍染料or AOPI熒光染料?

發(fa)布時間(jian):2023-06-13瀏覽:564次

細胞計(ji)數(shu)是細胞培養過程中的(de)(de)重要(yao)步(bu)驟(zou),為了(le)解細胞的(de)(de)濃(nong)度、數(shu)量(liang)和活率等信息(xi),實驗人員常用(yong)臺盼藍染(ran)料(liao)或(huo)AOPI熒光染(ran)料(liao)對細胞進行染(ran)色-計(ji)數(shu)。


1、臺盼藍染色法

臺盼藍(lan)染色(se)是細胞計數中常用的活/死細胞鑒定(ding)染色(se)方法之一。


原理:正(zheng)常(chang)的(de)活細胞(bao)(bao)(bao),胞(bao)(bao)(bao)膜(mo)(mo)結構(gou)完整,能(neng)夠(gou)排斥臺盼藍,細胞(bao)(bao)(bao)不被(bei)染色(se);而(er)死細胞(bao)(bao)(bao)的(de)胞(bao)(bao)(bao)膜(mo)(mo)不完整,通透性增(zeng)加,死細胞會被(bei)染成藍色(se),利用臺盼藍染料的特性便可區分活/死細胞。

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缺點

1-臺(tai)盼藍對細胞(bao)有(you)毒害作用,會致死有(you)損(sun)傷的細胞(bao),導致細胞(bao)活性檢(jian)測結(jie)果有(you)所偏差;

2-細胞碎片(pian)多(duo)、雜質多(duo)等情(qing)況下,無法進行準(zhun)確計數。

 

適用(yong)細胞種類:培(pei)養系(xi)細胞。


2、AOPI染色法

當細(xi)胞樣品中的雜質過(guo)多,明場下(xia)無法進行準確(que)計數時,我(wo)們可以在熒光通(tong)道下(xia),用AOPI熒光染料對細(xi)胞進行染色。

 

原理:AOPI熒光染料因其只與DNA和RNA結合的特性——既活細(xi)胞呈(cheng)現綠色(se)(se),死細(xi)胞呈(cheng)現紅色(se)(se),利用AOPI染色法,可排除雜質對目標細胞的干擾,快速區分活/死細胞。

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優(you)點:排除(chu)紅細胞(bao)(bao)、血小板、細胞(bao)(bao)碎片等雜質對目標細胞(bao)(bao)的干擾。


缺點:與臺盼藍試(shi)劑(ji)相比(bi),成(cheng)本(ben)較高。


適用(yong)細胞(bao)種類(lei):免(mian)疫(yi)細(xi)胞(bao)、原代細(xi)胞(bao)、血液細(xi)胞(bao)等。

 

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